介绍

发展中国家的虾类养殖有助于其经济增长并提供就业来源（Patil 等，2021）；在这项活动中，全世界南美白对虾的产量（4,966241吨）超过了其他对虾的产量（154,615吨）（粮农组织，2018年）；然而，传染病和不同的环境条件一直是任何品种虾类养殖面临的持续挑战（FAO，2018），给虾类养殖业造成巨大的经济损失和不稳定（Varela 等，2017）。病毒性疾病是最难控制的疾病，因为其传播能力强、感染途径多、野生和栽培宿主范围广。王等人，1997）。白斑综合症病毒（WSSV）是致病性最强的虾病毒之一，感染全世界范围广泛的十足目甲壳类动物；其中一些具有载体或储存库的作用（ Flegel & Alday，1998； OIE，2019）。在首次出现临床症状后的三到十天内，这种病毒还会导致大量死亡，死亡率高达 100%（ Marks，2005）。

尽管对 WSSV 的存在引起的疾病和死亡进行了管理和控制，但迄今为止，虾生产中唯一有效的替代方案是实施生物安全或排除措施，例如过滤和消毒（Esparza-Leal 等，2009） 。然而，科学研究目前的重点是通过评估和开发免疫刺激添加剂来改善管理实践和减少应激条件，这已成为一种新颖且有前途的策略，为南美白对虾针对病原体的抗性和预防措施奠定了基础（Barracco等）等，2014）。

免疫刺激物质是通过天然来源获得的，也可以根据天然产物的分子结构通过化学合成获得，这些物质具有调节或修饰免疫反应的能力；因此它们也被称为免疫调节剂或免疫增强剂，可以被定义为调节免疫系统并增强宿主对病原体引起的疾病的抵抗力的天然成分（Bricknell＆Dalmo，2005）。

牛等人。(2018)提到，使用大型藻类坛紫菜（2.51 和 3.14%）作为水产饲料中的补充剂可改善南美白对虾的免疫反应，增强对病毒和细菌的抵抗力，改善肠道功能和对氧化应激的抵抗力。

DebMandal & Mandal (2011)回顾了传统印度医学中 C. nucifera 的生物活性化合物在健康促进和疾病预防方面的作用。椰子的这些生物活性化合物主要是中链脂肪酸，如月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸、酚类化合物和维生素E（ Montoya，2021）。鉴于白斑综合症对养虾业的负面影响，值得注意的是，椰子可以具有抗病毒、抗菌、抗寄生虫活性，并且在各种动物模型中也具有免疫刺激作用，包括针对 SARS-CoV-2 的潜在抗病毒作用（ DebMandal 和Mandal，2011 年； Elsbaey 等人，2021 年； Angeles Agdeppa 等人，2021 年）。

在目前的工作中，对饮食中添加的椰子油（C. nucifera）进行了评估，该椰子油具有抗病毒潜力，可减少南美白对虾养殖中白斑病毒引起的死亡率。

材料与方法

道德考虑。本研究符合墨西哥官方标准 NOM-062ZOO-1999，实验动物生产、护理和使用的技术规范。南美白对虾不被视为濒危或受保护物种。

虾对养殖条件的适应。为了进行生物测定，从纳亚里特州圣布拉斯的水产养殖场收集了假定健康的虾，并立即将其装在 100 L 塑料容器中，运至国家渔业工程学院 (ENIP) 的实验分子生物技术实验室 (LABME)，并盛有水来自养殖池和曝气的污染物 (= 5.4 ± 0.12 mg/L)。虾适应养殖条件48小时，调整盐度2‰/h直至达到35‰。使用容量为 1000 L 的塑料罐，其中含有 800 L 过滤海水（20 µm）；这些生物体保持连续通气，然后每天两次08:00和17:00用商业饲料（AC，35%蛋白质）饲喂相当于其总生物量5%的每日定量。

用椰子油 (C. nucifera) 制备实验饮食：根据 AOAC (2012) 提出的方法，对用于制备实验日粮的 EVCO 进行了脂肪酸谱分析。为了添加特级初榨椰子油（冷榨），AC 在食品加工机（Oster® 型号 FPSTFP1355）中粉碎；每 0.5 kg-1 饲料中，AC 与椰子油 (EVCO) 混合比例为 2.5% 和 5%。混合物制成后，添加 grenetin (4%) 于 180 mL 蒸馏水中的溶液，直至形成糊状物。使用配有 3/32" (3 mm) 模具的绞肉机（Torrey 型号 22）将所得糊状物制成颗粒。将形成的颗粒置于托盘中脱水并在室温下干燥 24 小时；然后将饲料储存在 4°C 下。

实验饮食的近端分析。对 AC 和含 2.5% EVCO 的 AC 以及含 5% EVCO 的 AC 进行了近端分析。所进行的分析包括采用方法 NMX-F-083-1986 进行的水分分析、采用方法 NMX-F-607-NORMEX-2013 进行的灰分分析、采用方法 NOM-086-SSA1-1994 进行的脂质（醚提取物）分析（规范性附录 C，数字 1） 、蛋白质 (NX6.25)（采用 NMX-F-608-NORMEX-2011 方法）、粗纤维（采用 NMXF-613-NORMEX-2017 方法）和总碳水化合物（采用 NOM-051-SCFI/SSA1-2010 方法）（通过近似分析的差异）。

WSSV病毒接种物及其PCR分子检测。WSSV 病毒接种物 (251018) 由区域综合发展跨学科中心 (Centro Interdisciplinario para el Desarrollo Integral Regional, CIIDIR IPN Unidad Sinaloa) 捐赠，在使用前使用简单的 PCR 进行了分析（Kimura 等人，1996 ） ）。接种物和生物体中 WSSV 的检测通过终点 PCR 分两个阶段进行；首先用简单的 PCR 分析样品，然后使用Kimura 等人提出的寡核苷酸通过巢式 PCR 分析阴性样品 。（1996）。

WSSV 患病率分析。患病率是根据Margolis 等人分析的生物体数量中患病和/或 WSSV 感染生物体的百分比来确定的。（1982）。

血淋巴提取和总血细胞计数 (THC)。在第一次食物配给之前（上午 7:00-8:00）进行血淋巴提取，以避免昼夜节律周期的差异；用无菌注射器(1mL)在腹侧动脉中获取血淋巴( Fisher等，1995 )。注射器预装 200 µL 等渗 SIC-EDTA 抗凝溶液（450 mM NaCl、10 mM KCl、10 mM EDTA-Na2、10 mM HEPES、pH 7.3 和 850 mOsm kg-1），预冷（4°） C) 虾（Vargas-Albores 等人，1993），置于冰上的无菌 1.5 mL 管中。取 50 µL 2:1 稀释的 SIC-EDTA 血淋巴，与 150 µL (1:3 v/v) 4% 预冷甲醛溶液混合以固定血细胞。使用带有 0.01 mm 标线的 Neubauer 相机在双目显微镜 (Leica DM300) 下根据该稀释度进行个体计数。根据Cabrera-Pérez 等人的研究，通过总血细胞计数评估虾的免疫反应。（2019）：

(THC)（细胞/mL）=（Hc * D * C）/0。4、

式中：Hc为计数的血细胞总数；D 是血淋巴稀释因子，C 是转换因子 x 0.1 mm3 x mL (1000)。

生物测定 I. 作为免疫刺激剂的 C. nucifera 油的浓度评估。该生物测定的持续时间为20天；它是在容量为 200 L 的塑料罐中进行的，其中含有 180 L 的海水（35 ‰），经过过滤（20 µm）并持续曝气。生物测定由三个处理组成，每个处理一式三份（每个池 30 只虾，平均初始重量为 5.46 ± 0.19 克）： I) AC 对照；II) AC + 2.5% EVCO；III) AC + 5% EVCO。实验生物每天喂食两次（上午 8:00 和下午 17:00）。在生物测定过程中，每天监测两次物理化学变量：用 Hanna Hi98130 电位计测量 pH 值，用 ATAGO 2491 型折光仪测量盐度，用 YSI pro20i 多参数测量温度和溶解氧。

每 10 天使用 YSI 9500 光度计测定一次铵、亚硝酸盐和硝酸盐。在每次生物测定结束时，使用以下方程确定存活率：

S = (N° ind f / N° ind. i ) * 100

其中 N° ind f 是生物测定结束时的活个体数，N° ind i 是生物测定开始时的活个体数 ( Escobar-Gil et al., 2017 )。具体增长率 (SGR) 由以下公式确定：

SGR (%day − 1) = [100 * (LnW2 − LnW1)]t

其中：W2 是最终重量，W1 是初始重量，t 是培养天数（Ziaei-Nejad 等，2006）。

如Cabrera-Pérez 等人所述，通过总血细胞计数评估虾的免疫反应。（2019）。在 THC 中分析了个体 (27) 个生物体，每个处理 9 个生物体，占每个处理总种群的 30%。

生物测定 II. 评估在 WSSV 感染的南美白对虾饮食中添加的椰子油的抗病毒活性。生物测定的持续时间为 27 天，其中第 23 天，虾被 WSSV 接种物感染。实验在容量为 80 L 的水族箱中进行，水族箱中装有 50 L 经过滤（20 µm）的海水（35 ‰）。生物测定包括四种处理，每种处理一式三份（每个水族箱 10 只虾，平均重量为 7.7 ± 0.25 克）： I) CF + WSSV；II) CF + 2.5% EVCO + WSSV；III)CF控制；IV) CF 对照 + 2.5% EVCO。实验生物每天喂食两次（上午 8:00 和下午 17:00）。在生物测定期间，以与两年一次的测试 I 相同的方式每天监测两次理化变量。

在每次生物测定结束时，根据Escobar-Gil 等人的方法确定存活率。(2017)和根据Ziaei-Nejad 等人的 EGR。（2006）。在感染之前，对养殖场的虾进行了初步 WSSV 流行率分析，结果为 100%（通过巢式 PCR 测定）。第23天，处理I和II的虾再次感染先前感染WSSV的虾的接种物10μL，用0.3Ml胰岛素注射器注射到第二腹节的背侧部分；此外，这些处理（I 和 II）中的生物体用来自 WSSV 感染虾的糊状物喂养。

如前所述对虾中 WSSV 的患病率进行了量化（Margolis 等，1982）。为了确定 WSSV 的流行情况，对受感染的虾进行观察，直到它们表现出明显的白斑病迹象。每个处理中的 30 个生物体被单独测试；此外，收集并处死垂死的生物体，以通过单一和巢式 PCR 验证 WSSV 的存在；它们储存在-80 ℃。还通过总血细胞计数评估虾的免疫反应（Cabrera-Pérez 等人，2019）。对每个重复的 3 个生物体进行 THC 单独分析，每个处理 9 个生物体，占每个处理总种群的 30%。

统计分析。进行正态性 (Kolmogorov Smirnov) 和同方差性 (Bartlett) 检验、单向方差分析 (ANOVA) 和 Tukey 多重比较检验 (HSD)，以确定生存率、特定生长率、总血细胞计数和WSSV 患病率；使用 STATISTICA 版本 6 程序 ( StatSoft 2003 )。p<0.05 的值被认为有显着差异。根据Font 等人的说法，使用反正弦函数转换生存率和患病率数据。（2007）。

结果

椰子油 (C. nucifera) 的脂肪酸谱。总共鉴定出 36 种脂肪酸，其中 12 种呈现百分比值（克/100 克脂肪）（表 1）。其余脂肪酸的值低于最小可检测校准限 <0.01。在该测定中，94.52% 对应于饱和脂肪，4.90% 对应于单不饱和脂肪，0.83% 对应于多不饱和脂肪。

实验饮食的化学近端成分。治疗 I (CF)、治疗 II (CF + 2.5 % EVCO) 和治疗 III (CF + 5 % EVCO) 的近端分析结果列于表 2。处理III的含水率最低，为10.91%，其次是处理II，为12.30%，处理I为12.37%。处理I、III和II的灰分百分比分别为8.12%、8.34%和8.52%。至于脂质，治疗 I 的百分比为 5.26%，其次是治疗 II 的 7.64%，治疗 III 的百分比为 10.09%。蛋白质百分比分别为32.89%、34.53%和35.28%，对应处理III、II和I。处理II粗纤维含量为4.53%，处理III为6.86%，处理I为9.67%；而就总碳水化合物而言，百分比最低的是处理 II，为 37.01%，其次是处理 III，为 37.77%，处理 I 为 38.97%。

生物测定 I.

理化参数。根据Brock & Main (1994) 的说法，在 20 天的生物测定期间，评估的理化参数保持在南美白对虾培养的最佳范围内。

水质（铵、亚硝酸盐和硝酸盐）。根据Boyd (2001)和SENASICA (2003)的说法，在培养过程中，氮化合物的浓度处于白虾养殖的最佳范围内。

存活率和特定生长率 (SGR)。治疗之间的生存率没有发现显着差异（p = 0.256）；然而，治疗I中的存活率（图1）为100%，而在使用2.5%和5%EVCO的治疗II和III中，分别获得了93.33%和98.89%的值。

统计分析显示，各处理之间的 EGR（% day-1）没有显着差异（p = 0.668）；然而，治疗 I 的 EGR 较高，为 1.44 ± 0.32 (%day-1)，治疗 II 为 1.41 ± 0.13 (%day-1)，治疗 III 为 1.28 ± 0.11 (%day-1)（图 2） 。

血细胞总数 (THC)。处理 I 中每毫升血淋巴总血细胞计数的平均值为 3.83 x 106 ± 0.52 x 106 个细胞/mL。在处理 II 和 III 中，分别为 4.11 x 106 ± 0.36 x 106 细胞/mL 和 3.92 x 106 ± 0.50 x 106 细胞/mL。方差分析 (ANOVA) 显示处理之间没有显着差异 (p = 0.449)

根据获得的结果，虽然EVCO处理之间没有发现显着差异，但选择处理II（2.5％EVCO）进行以下生物测定，因为它是EVCO使用量最少的处理，并且EGR和EGR的结果也是如此。该处理中的 THC 高于其他处理。

生物测定 II.

理化参数。根据Brock & Main (1994) 的说法，在 27 天的生物测定期间，评估的理化参数保持在南美白对虾培养的最佳范围内。

水质（铵、亚硝酸盐和硝酸盐）。根据Boyd (2001)和SENASICA (2003)的说法，在培养过程中，氮化合物的浓度处于白虾养殖的最佳范围内。

具体增长率（SGR）。SGR（%day-1）在处理之间没有显示出显着差异（p = 0.644）（图4）。治疗 I 呈现 0.60 ± 0.10 %day-1，治疗 II 呈现 0.58 ± 0.08 %day-1；处理 III 的每日特定生长率最高，为 0.73 ± 0 .29 (%day-1)，处理 IV 的每日特定增长率为 0.69 ± 0.10 %day-1。这些结果表明 EVCO 对 SRG (%day-1) 没有影响。

WSSV 的存活率和患病率。治疗 I 和其余治疗之间的生存率（图 5 ）显示出显着差异（p = 0.0030）。在治疗 I（对照感染 WSSV）中，存活率较低，为 83.3%，其次是治疗 II（感染 WSSV），存活率为 93.3%。在治疗 III 和 IV 中，存活率为 100%。结果表明，尽管感染了WSSV，但使用2.5％EVCO的处理II中的微生物比同样感染了WSSV的处理I中的微生物表现出更高的存活率，因此可以认为EVCO对WSSV具有有益效果。

养殖场对虾的初始 WSSV 流行率为 100%（通过巢式 PCR 测定），仅在处理 I 和 II 中再次感染时，流行率为 100%（通过单次 PCR 测定）。然而，在生物测定结束时，对所有治疗方法的 WSSV 患病率进行了分析，没有发现显着差异 (p = 0.2192)。处理 I 对虾的 WSSV 最终患病率为 100%（通过简单 PCR 测定），处理 II 对虾的 WSSV 最终患病率为 96.67%（其中简单 PCR 测定为 86.21%，巢式 PCR 测定为 13.79%），其中 93.33 % 活着被感染，3.33% 被感染死亡，剩下的 3.33% 没有被感染。在处理 III 的虾中，患病率为 100%（通过巢式 PCR 测定），在处理 IV 的虾中，患病率为 93.33%（其中 100% 通过巢式 PCR 测定），其中 93.

据观察，在治疗 II 中，不仅患病率降低至 3.33%，而且病毒载量（通过巢式 PCR 测定）也降低了；而对于 IV 治疗，患病率下降了 6.67%（通过巢式 PCR 确定）。结果显示，2.5% EVCO 治疗具有降低 WSSV 流行率和病毒载量的效果

血细胞总数 (THC)。总血细胞计数的统计分析显示治疗之间没有显着差异（p = 0.413）。治疗 III 中每毫升血淋巴的总血细胞计数较高，平均为 4.37 x 10 6 ± 0.52 x 10 6细胞/mL，其次是治疗 IV，平均为 4.27 x 10 6 ± 0.46 x 10 6细胞/mL，治疗 II治疗I的平均为4.10 x 10 6 ± 0.46 x 10 6细胞/mL，处理I的平均为3.99 x 10 6 ± 0.57 x 10 6细胞/mL

讨论

由于病毒和细菌等不同病原体引起的疾病所产生的负面影响，以及它们对用于治疗和控制传染病的抗生素的耐药性（Lieberman等，2006），有必要实施新的提高水产养殖重要物种的免疫力并增强对病毒和细菌的抵抗力的策略，还通过在水产饲料中添加天然免疫刺激添加剂来增强对应激的抵抗力（Berger，2000；Rendón＆Balcázar，2003）。

根据图尔基尼等人的说法。(2009)和Turchini 等人。(2011)，用作膳食添加剂的主要替代品之一是植物油，因为它们提供多种低分子量的中链脂肪酸 (MCFA)。根据Kapilan & Reddy (2008)和Akinnuga 等人的说法。(2014)，椰子油主要由MCFA组成；除了多种酚类化合物外，根据Nevin 和 Rajamohan (2009)的说法，它们还能增强抗氧化酶的活性并消除细胞中多余的自由基。另一方面，卢等人。(2018)指出，就月桂酸而言，它可以刺激某些水生物种的生长和健康，例如黄颡鱼。在这项工作中使用的 EVCO 的脂肪酸谱分析中，月桂酸的浓度为 49.47%（克/100 克脂肪），其中高浓度表明这种油可以用作当前病原体问题的替代治疗方法在虾养殖中，因为它可以添加到饲料中以对抗 WSSV 或降低其病毒载量。

据牛等人介绍。(2018)，用于培养系统或饲料的物质不应改变营养价值或对生物体的生产性能产生负面影响。这与目前的化学近端成分结果一致，其中表明添加 EVCO 不会影响实验日粮的营养价值，并且发现在Martínez-Córdova 等人报告的南美白对虾发育的最佳值内等人。（2014）。关于 EGR，在生物测定 1 和 2 中，当使用不同浓度的 EVCO 时，在虾中没有观察到影响。在生物测定1中，观察到随着脂质浓度(重量％)增加，EGR显示出降低的趋势。根据Cahu (1994)，建议商业虾饲料的最佳脂质水平为 6% 至 7.5%，但不超过 10%；然而，在这项研究的结果中，尽管处于总脂质的最佳水平（510% ）在虾的饮食中。根据马丁内斯-科尔多瓦等人的说法。(2014)和López-Marcos (2020) 中，可以认为较低的 EGR 是由于脂质水平过高造成的 ( Cahu, 1994 )。

关于椰子油对南美白对虾影响的科学文献很少；然而，本研究的EGR结果与Apraku等人报道的结果一致。(2017)，他们评估了初榨椰子油和鱼油的混合物对尼罗罗非鱼 ( Oreochromis niloticus ) 的生长和对海豚链球菌的抵抗力，发现当部分和完全取代初榨椰子油时，生长没有受到影响。此外，这些结果与其他使用植物油的研究结果一致，例如Mozanzadeh 等人。(2015) ; 谁表明幼年Sparidentex的生长表现即使用植物油替代饮食（菜籽油和葵花籽油）喂养，在部分或完全取代鱼油饮食时也没有受到影响。

关于生存率，在生物测定 1 中，治疗之间没有发现显着差异；而在生物测定 2 中，100% 的生物体来自感染 WSSV（低病毒载量）的养虾场池塘，但另外在处理 I 和 II 中进行了再感染，导致生物测定结束时病毒载量较高，并且与其余治疗 II (EVCO with WSSV)、III (CF) 和 IV (EVCO) 相比，治疗 I (CF with WSSV) 中观察到最低存活率 (83. 3 %)。这些结果与Raa (1996)一致世卫组织提到，在水产养殖领域使用免疫增强剂的目的是提高养殖生物的存活率和免疫力。这与当EVCO添加到虾饲料中时，高病毒载量和低病毒载量（WSSV）的受攻击虾的存活率显着更高的事实相一致。这可能是由于Fife (2013)指出，通过每天摄入椰子油来使用月桂酸，可以保护和预防不同病毒引起的感染，如人类免疫缺陷病毒 (HIV)、麻疹、疱疹病毒、流感病毒等疾病。

血细胞负责凝固、外骨骼硬化和异物去除（AftabUddin 等，2017）。在本研究的生物测定I中，相对于处理I（CF），含有EVCO添加剂的处理（II和III）获得了更高的总血细胞计数；表明用这种添加剂喂养的虾的免疫反应有所增强。在这方面，Sequeira 等人。(1996)提到当虾喂食免疫刺激剂时，血细胞增殖可增加三倍；然而，尽管在生物测定II中，治疗之间没有发现显着差异，但相对于治疗III和IV，观察到治疗I和II（感染WSSV）的THC降低。这些结果与Niu 等人的报道一致。(2018)，他们用不同的饮食价值喂养虾，刺激大型藻类的免疫，并且在受到 WSSV 攻击后，血细胞数量显着减少。血细胞总数的减少可能是由于血细胞迁移到感染部位（Söderhäll 等，2003）或存在组织损伤的部位（Niu 等，2018）。

白斑病已导致全世界虾类养殖严重死亡( Jiang et al., 2006 )，造成该行业巨大的经济损失(S ahul et al., 2006 )，因此有必要预防或控制白斑病（Huynh 等人，2011）。在生物测定 II 的开发过程中，观察到初始流行率为 100% WSSV（通过巢式 PCR 测定），病毒载量较低，这意味着所有生物体均来自农场的受感染生物体。应该指出的是，治疗 I 和 II 均用病毒接种物重新感染以进行实验，在生物测定结束时观察到，治疗 I 中的最终患病率为 100%（通过单次 PCR 测定），且病毒载量较高，在治疗 III 中，患病率为 100%（通过巢式 PCR 确定）；而在 EVCO 治疗中，治疗 II (2.5 % EVCO + WSSV) 和治疗 IV (2.5 % EVCO)。患病率分别下降至96.67%和93.33%；然而，据观察，在治疗II中，不仅病毒流行率下降了（96.67%），而且病毒载量也下降了；其中86.

EVCO 治疗中患病率和病毒载量的下降表明，其作为膳食补充剂的应用可发挥针对 WSSV 的抗病毒活性，并以与Lieberman 等人报道的类似方式减少病毒载量。(2006)和Fife (2013)指出 EVCO 由 MCFA 组成，例如：其成分中约含 48-50% 的月桂酸，其次是约 15% 的肉豆蔻酸 ( Fife, 2013；Ruiz 等人., 2016 )、辛酸 (8%) ( Fife, 2013 ; Akinnuga 等人, 2014 ) 和癸酸 (7%) ( Fife, 2013 )。这些化合物已被证明可有效对抗细菌、真菌和病毒（Esquenazi 等，2002）。就病毒而言，Oyi 等人。(2010 ) 提到，椰子油中一种名为单山羊碱的成分可在一分钟内消灭HIV 和单纯疱疹病毒(HSV)。同样，Fife (2013)报道，椰子油中存在的 MCFA 可以灭活病毒，例如 HIV、与急性呼吸综合征相关的冠状病毒、麻疹病毒、风疹病毒、疱疹病毒、肉瘤病毒、呼吸道合胞病毒、人类嗜淋巴细胞病毒（1 型）、水泡性口炎病毒、维斯纳病毒、人类巨细胞病毒（CMV）、EB病毒（EBV）、流感病毒、丙型肝炎病毒（HCV）和柯萨奇B4病毒。在这方面，Murray (1994)和Dayrit (2000)据记录，感染同一病毒的人的艾滋病病毒载量下降到不可检测的水平，并且食用椰子后他们的健康状况显着改善。因此，建议由月桂酸等 MCFA 组成的 EVCO 提供了降低病毒载量的可能性，这反过来又可以用作 WSSV 感染情况下的免疫治疗和预防性治疗。

结论

结果表明，饲料中添加2.5%的EVCO促进了南美白对虾幼鱼WSSV流行率和病毒载量的降低；它对南美白对虾的生存和 THC 没有表现出负面影响。此外，没有免疫抑制或免疫反应减少，因为两种生物测定的治疗之间的 THC 没有显着差异。

这项研究工作是第一份关于Cocos nucifera EVCO 对受到 WSSV 攻击的白虾（Litopenaeus vannamei ）生存影响的报告。因此，建议开展对虾饲养中不同配方方案和施用次数下EVCO在饲料中的应用研究。此外，有必要进一步研究EVCO添加到饲料配方中时的免疫营养反应。