介绍

养蜂业是墨西哥尤卡坦半岛（包括尤卡坦州、坎佩切州和金塔纳罗奥州）的主要经济活动之一，其蜂蜜因其与半岛独特的开花类型相关的感官特性而在国内和国际市场上受到青睐。然而，这种活动受到瓦螨病、吸鼻病和螨病等疾病的威胁（Loeza et al., 2020）。瓦螨病由瓦螨引起，鼻螨病由微孢子虫微孢子虫和蜜蜂微孢子虫引起，螨病由气管螨Acarapis woodi引起。这三种疾病对于养蜂业具有卫生和经济重要性（Arechavaleta等人，2021），因为它们的存在会减少蜂蜜产量，甚至导致蜂巢部分或全部损失（ Martínez & Medina等人， 2011a）。

意大利蜜蜂易感染瓦螨、微孢子虫和螨虫，这对蜂群的发育和生产力产生不利影响（Guzmán等，2010）；这是因为瓦螨是一种体外寄生虫，以蜜蜂的脂肪体为食，影响幼虫的泳动发育，从而降低蜂王和雄蜂的寿命和繁殖能力，从这个意义上说，瓦螨病被认为是世界养蜂业的主要威胁（Ramsey等人，2019；Genersch等人，2010）。微孢子虫是一种微孢子虫真菌，通过粪便传播，感染幼年蜜蜂的中肠上皮细胞，影响消化功能，导致蜜蜂营养不良、生理衰老、下咽腺减少和过早死亡（Forsgren & Fries, 2010）和螨虫是影响呼吸系统的成年蜜蜂的内寄生螨，它对呼吸系统造成的改变取决于气管中寄生虫的数量，造成机械损伤，例如阻塞气道，妨碍其正常功能（Delannoy & Gislainne， 2006）。

尽管这些病原体造成的损害已有详细记录（Otis & Scottdupree, 1992；Çakmak等人，2003；Higes等人，2008；Le Conte等人，2010），但许多国家仍缺乏诊断方法。 ，因此缺乏对蜂群或与蜜蜂共存的病原体的健康状况的了解，这可能导致不恰当地使用化学品进行控制，从而导致病原体的自然抵抗力（Rodríguez-Dehaibes等人，2005 年）；布兰科等人，2006；马丁内斯等人， 2011b），从这个意义上说，保持蜜蜂良好的健康状况就成为养蜂人面临的挑战。

本研究的目的是确定墨西哥坎佩切州两个地区瓦螨、微孢子虫和螨虫流行率的变化。

材料和方法

采样地点

该研究在坎佩切霍佩尔兴高等技术学院的养蜂场进行，该学院位于北纬 19°76′41″，西经 89°86′68″，海拔 100 米，最低温度为 23 °C，最高温度为 376 摄氏度。 °C，降水量 140. 7 毫米，湿度 74 %，位于坎佩切研究生院校园附近的养蜂场位于坎佩切州 Champotón Sihochac 地区，北纬 19.50°13′89"，西经 90.58°61′11"海拔 20 m，最低气温 23 °C，最高 35 °C，降水量 163 mm，相对湿度 98.5%。两地均以暖半湿润气候(w)为主，夏季降水量小于5.0毫米，年平均降水量为1,050毫米，5月至10月有降雨，年气温在19.5至32.5℃之间，考虑平均值为 26 °C (WeatherSpark 2021）。

样本量

2020年6月至8月和2021年8月，我们从Hopelchén镇的5个养蜂场随机抽取了64个蜂箱，从Sihochac镇的5个养蜂场随机抽取了52个蜂箱。

样品采集

采集样本以诊断瓦螨、微孢子虫和螨虫的存在及其感染程度；经墨西哥研究生院动物福利委员会批准，从育雏室第三和第四框架之间的每个蜂巢收集了大约 300 只蜜蜂，并保存在无水乙醇溶液中直至进行分析。本研究中使用的方法是根据墨西哥官方标准NOM -001-ZOO-1994（全国防治蜜蜂瓦螨病运动）进行的。

瓦螨诊断

该诊断是使用De Jong等人描述的方法进行的。(1982)进行了修改（Loeza-Concha等人， 2020），因此程序包括用蜜蜂以 60 rpm 的速度摇动罐子 10 分钟，然后将内容物放入包含 3 毫米网孔的锥形容器中，这容器中充满无水酒精，直至完全覆盖蜜蜂，然后用玻璃棒以圆周运动摇动样品，使螨虫与蜜蜂分离，并通过重力将其沉积在锥体底部，最后，将溶液通过白布倾倒并记录螨虫的数量。瓦螨通过将发现的螨虫数量除以观察到的蜜蜂数量并将结果乘以 100 来确定侵扰水平（De Jong等，1982）。

微孢子虫诊断

该诊断是使用Loeza等人(2021)描述的 Cantwell 技术做出的，因此该程序包括浸渍 25 个成年蜜蜂的腹部，然后将浸渍液用 0.2 毫米的筛子过滤，并放置在筛子中，其中取液滴在400X的光学显微镜下进行分析；阳性样品在 Neubauer 室中再次评估，以确定存在的孢子数量，将观察到的孢子数量除以 80 并将结果乘以 400 万即可获得侵染水平。

螨虫诊断

诊断是根据（Bailey，1985）描述的方法进行的，使用20只成年蜜蜂，用昆虫学别针将其固定在解剖台上，然后用钟表匠的镊子和手术刀头去除每只蜜蜂的第一对腿，然后在第一对腿和第二对腿之间穿过中胸进行横向切割，以暴露胸环。将其置于头尾位置的载玻片上，加入一滴 10% 乳酸溶液 24 小时，以澄清组织并便于修正，在 400X 的光学显微镜下观察这些样品以确定是否存在或没有螨虫。

疾病患病率

该诊断是通过将存在寄生虫（瓦螨、微孢子虫或螨虫）的荨麻疹数量乘以 100，再除以每个时期评估的荨麻疹总数来确定的（Loeza等，2021）。

统计分析

使用单效应模型对数据进行分析，其中评估的效应是在完全随机设计下的Hopelchén 和Sihochac 地区。为了确定两种疾病患病率之间的差异，进行了卡方检验，并为了确定 Hopelchén 和 Sihochac 地区不同水平的瓦螨和微孢子虫感染之间的差异，使用 tStudent 检验进行了平均值比较。为了将瓦螨、微孢子虫的存在与研究区域联系起来，使用了皮尔逊相关性检验。最后，确定微孢子虫的存在是否对瓦螨的存在有影响，使用社会科学统计包 (SPSS) 20.0 版软件IBM, 2011进行优势比 (OR) 分析。

结果

与 Sihochac 地区相比，Hopelchén 地区的瓦螨患病率较低，分别为 98.5 % 和 100 %，但没有发现统计学差异 (p=0.365)，同样，与 Sihochac 地区相比，Hopelchén 地区的微孢子虫患病率较高，分别为 85.9 % 和 88.0 %，统计检验表明不同地区的患病率存在​​差异（p=0.023）。与 Sihochac 地区相比，Hopelchén 地区的瓦螨感染水平较高，每 100 只蜜蜂分别有 7.32 和 3.73 只螨虫，两个地区之间存在统计差异 (p= 0.048) 。与 Sihochac 地区相比，Hopelchén 地区的感染水平更高，每 100 只蜜蜂分别有 7.32 和 3.73 只螨虫，两个地区之间存在统计差异 (p= 0.048)。048)，与 Sihochac 地区相比，Hopelchén 地区的微孢子虫感染水平较低，每只蜜蜂分别有 78x10 5和 23x10 6 个孢子，两个地区之间存在差异 (p=0.022)，如表 1所示。在所有评估的区域中均未发现A. woodi的存在。微孢子虫和瓦螨的存在之间呈正相关 (p=0.000)在这两个地区都发现了。比值比 (OR) 表明，在存在瓦螨的情况下，发现微孢子虫的概率要高 1.08 ，但是，该概率在统计上并不显着。

讨论

鼻塞病和瓦螨病是全球养蜂业的主要卫生问题，因为它们会导致蜜蜂血淋巴和脂肪体的损失，从而降低其使用寿命和生产能力，从而产生有害影响（Ramsey等人，2019 年；Genersch等人） al ., 2010 ; Branchiccela, 2014）从这个意义上说，在坎佩切州这两个地区发现的结果表明，蜂群中瓦螨和微孢子虫的同时侵染代表了一个重要的卫生问题，这表明该地区存在技术水平低或完全或部分不了解瓦螨的存在和控制和微孢子虫。

从这个意义上说，Guzmán-Novoa等人。(2010)表明瓦螨是蜂群死亡的主要原因，因为 85% 与蜂箱的损失有关。同样，Higes等人。(2008)表明，蜂群中存在微孢子虫会导致蜂群突然崩溃，建立了微孢子虫与田间条件下蜂群死亡之间的直接相关性，从这个意义上说，瓦螨和微孢子虫在蜂群中的存在坎佩切州代表着危险和可能失去的殖民地。

根据上面提到的两个评估区域（Hopelchén-Sihochac），发现92.25%的评估菌落同时受到瓦螨和微孢子虫侵染，6.89%在没有微孢子虫的情况下出现瓦螨，0.86%在没有瓦螨的情况下出现微孢子虫，强调所有接受评估的蜂巢都有一定程度的感染。

研究地区（Hopelchén 和 Sihochac）的瓦螨流行率分别为 98.5% 和 100%，感染水平分别为每 100 只蜜蜂 7.32 和 3.73 只螨，结果可以与共和国其他州（例如尤卡坦州、据报道，瓦螨的患病率分别为 63.6% 和 97%，感染水平为每 100 只蜜蜂 2.89 和 0.2 只螨虫（Martínez等人，2011b；Martínez & Medina ， 2011a ），同样，萨卡特卡斯州瓦螨的患病率和感染水平为 62每 100 只蜜蜂 % 和 1.70 只螨虫（Medina-Flores等人，2014b），在墨西哥州，患病率为 100%，侵染水平分别为每 100 只蜜蜂 0.5 至 22.1 只螨（Martínez-Cesáreo等，2016），在纳亚里特州，患病率为 65.9% 和 79.1%，侵染水平据报道，每 100 只蜜蜂有 1.31 至 2.55 只螨虫（Loeza等人，2020 年）。

同样，瓦螨在世界各地的蜂巢中都有报道，例如在哥伦比亚，萨拉曼卡等人。Soroker等人(2012)发现 45% 的荨麻疹存在螨虫，同样，Calderón & Sánchez (2011)发现哥斯达黎加的患病率为 42% 。(2011)发现以色列的患病率为 21%，Torres 和 Barreto (2013)发现巴西的患病率为 11.13%，Moretto 和 Leonidas (2003)报告称每 100 只蜜蜂有 2.33 和 24.69 只螨虫感染， Guzmán-Novoa等人 ( 2013 ) 发现每 100 只蜜蜂有 2.33 和 24.69 只螨虫感染。(2010)报告称，加拿大安大略省每 100 只蜜蜂有 3.1 至 5.1 只螨虫。根据这些结果，建议由于报告的高患病率，瓦螨在该国的存在是一个令人震惊的问题。

同样，研究地区（Hopelchén 和 Sihochac）的微孢子虫患病率分别为 85.9% 和 88.0%，表明这种病原体的存在被认为很高，因此本研究中发现的结果高于共和国其他州的结果在纳亚里特州，形成受精核的荨麻疹的患病率为 33.0% 至 55.4%（Loeza等人，2020 年），同样，在尤卡坦半岛，Martínez 和 Medina（2011a）发现哈利斯科州塔皮亚的患病率为 81.8% -冈萨雷斯等人。(2017)报告称患病率为 100%，González等人在墨西哥共和国西北部进行的一项研究也类似。(2020)报道，蜜蜂微孢子虫的患病率在墨西卡利为 56.58%，蒂华纳为 58%，圣路易斯里奥科罗拉多为 7.89%；至于蜜蜂微孢子虫的存在，据报告，墨西卡利山谷的患病率为 15.79%，恩塞纳达为 2.63%，蒂华纳为 1.32%，圣路易斯里奥科罗拉多为 1.32%。

同样，世界不同地区也报告了微孢子虫的存在，例如西班牙，其患病率为 55.17%，哥斯达黎加为 67.5%，智利为 78.26%，阿根廷为 91.5%（ Calderón & Sánchez，2011；Hinojosa ） & Gonzalez, 2004 ; Tiranti et al ., 2017 ; Pacini et al ., 2016 ; Medina-Flores et al ., 2014 a)，根据上述情况，微孢子虫可能在世界范围内发现，可能是由于微孢子虫的抵抗力微孢子虫能够适应低温和高温，这使其能够在世界不同地区茁壮成长（福斯格伦和薯条，2010）。

目前的调查报告，研究区域 (Hopelchén- Sihochac) 中不存在A. woodi，因此，结果与 ( Martínez & Medina, 2011a；Martínez-Cesáreo et al ., 2016；Loeza et al ., 2020 年，他们指出墨西哥尤卡坦半岛和纳亚里特州不存在气管螨，从这个意义上说，我们同意Loeza等人(2020) 的观点，他们指出螨虫的不存在可归因于其对不同环境的不适应。然而，在墨西哥的热带地区，这种模式无法澄清，因为关于墨西哥东北部感染水平的最新报告可以追溯到 1985 年至 1986 年（艾森，1987）。

结论

本研究证实98.5% 和 100%存在瓦螨，85.9% 和 88.0% 存在微孢子虫， 92.2% 存在瓦螨和微孢子虫同时感染。在任何评估的地区都没有发现A. woodi的存在，本研究概述了技术的缺乏，以及对正确使用控制蜜蜂疾病的治疗方法知之甚少或根本不了解，在本研究中从某种意义上说，墨西哥坎佩切州蜜蜂健康领域的研究大门打开了。