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鲶鱼副产品的添加生物成分促进虾的生长 凡纳美对虾
摘要：虾产量的迅速增长需要大量的蛋白质来源于大豆和野生鱼粉,两者都变得短缺。与此同时,在越南,鲶鱼的生产和加工是一个巨大的工业,每年生产十万吨的蛋白质和脂肪丰富的副产品。利用鲶鱼副产品逐步取代虾养殖业中的传统蛋白质来源可能带来三重惠益:(1)减少对野生鱼粉开发的压力,(2)减少鲶鱼副产品的环境影响,(3)提高水产养殖生产的价值和可持续性。在这项研究中,我们利用鲶鱼副产品生产鱼类蛋白水解物和纳米羟基磷灰石(HA)作为太平洋白虾饲料的添加剂。 凡纳美对虾 )。在商业膳食中加入FH和HA的补充混合物(沙伦博克芬组,38%的蛋白质,6.5%的脂质),粗蛋白含量达到38%,38.5%,40%,43%,44%。虾的存活和生长每周评估到55天。结果表明,在饲料中,虾的粗蛋白含量最高,为43%,与商业参考饮食相比,虾的重量和长度分别增加了124%和112%。添加FH和HA对水质无不良影响。 弧菌 密度低于6.5×10 3 CU/ML,这是最低的 弧菌 密度对虾的生长发育有负面影响。结果表明,FH和HA的混合物是幼虫后虾饲料中有前途的添加剂。 L. vannamei 节食。
关键词: 海鲜副产品;鱼类蛋白水解物;羟基磷灰石;幼虫后虾;补充剂
导言
虾产量继续增加,2017年至2021年的增长率约为5.4%,2021年达到550多万吨( 安德森等人。,2019 )。太平洋白虾( 凡纳美对虾 )是最重要的水产养殖品种之一,约占虾产量的90%( FAO, 2022 )。在越南,白腿虾是2001年引进的,由于其生长速度快,繁殖期短于虎虾,已迅速成为主要的养殖品种( 单齿对虾 )。2020年,越南的白虾养殖面积约为10万公顷,产量为632000吨,约占越南虾总产量的67%。在虾养殖业,环境条件( 麦格劳等人。,2002年 ), food ( Chanratchakool, 2003 ),及储存密度( 马克等人。2010年 ; 泡等人。2011年 )是影响虾生长的三个主要因素。其中,人工饲料(鱼粉制品)占生产成本的60%( 谭等人2005年 )。然而,在扩大养虾业的同时,以海洋鱼类开发为基础的鱼粉已经达到了最大的供应能力( 塞西达兰和韦努加帕尔,2020年 )。因此,寻找虾饲料的替代来源对于扩大虾养殖至关重要和及时。
近年来,由于对鱼粉的需求不断增加和供应有限,研究了虾饲料配方中鱼粉的替代问题( Leduc等人。,2018年 ; 苏亚雷斯等人。,2020年 )。已进行了一些研究,以动物副产品来取代鱼粉,如肉类和骨粉、血液粉、羽毛粉和禽肉副产品。 L. vannamei ( 德迪奥斯,2001年 ; 福斯特等人。2003年 ; 塞西达兰和韦努加帕尔,2020年 )。然而,由于原材料供应有限、不可再生性和其他环境问题( 霍达等人。,2020年 )。需求的增加和供应的减少也会增加虾饲料价格,减少商业虾饲料中的动物蛋白( 戴维斯和阿诺德,1998年 ).
在越南,大约9万吨鲶鱼的副产品,包括头、脏器、装饰物、框架、皮肤、肝脏和鱼卵,可以每年排放( 越南等国,2020年 )。大量富含蛋白质和脂肪的材料会造成严重的环境问题,但可在水产养殖饲料生产中重复使用。事实上,利用这些低价值副产品来生产高价值产品,如富氨基酸和磷酸钙,是必要和及时的,可取代从野生捕获的小鱼身上获取的鱼粉,其中许多鱼几乎是从海洋中耗尽的( 汉等人。,2018年 ),包括越南( 泰兰等人。,2022年 )。另外,工业加工的鲶鱼副产品也可提供大量的优良成分,例如许多氨基酸和磷酸钙,可作为动物饲料的补充( 达席尔瓦·班比尔拉·阿尔维斯等人。,2021年 ),尤其是在虾饲料中,因为蛋白质的含量,特别是蛋白质的氨基酸和磷酸钙是主要的营养成分。鱼类副产品中的鱼类蛋白水解物(FH)作为水产养殖中营养的蛋白质来源具有许多用途( 罗斯兰等人。2014年 由于FH是天然的,安全的,蛋白质含量高,是不可替代的氨基酸,易于吸收和消化。此外,它提供了一种替代性的蛋白质来源,以取代部分水产养殖饲料,减少进口鱼粉。鲶鱼副产品还含有磷酸钙化合物(又称羟基磷灰石,HA),在生长和脱模过程中可以为虾提供生物钙和磷酸盐来源( 越南等国,2019 ),这可以是虾饲料的有价值的添加剂。
基于以上考虑,我们在本研究中制备了不同的FH和HA混合物,并与商业膳食相结合。对太平洋白虾的混合物进行了评估 L. vannamei 评估适合性,创造来源,增加数量,并多样化蛋白质来源用于虾饲料生产。这些组合物的补充物被认为是一种替代品,增加了蛋白质和矿物质的含量。此外,这种含有丰富氨基酸和钙的含磷物质,从鲶鱼副产品中获得的磷是一种潜在的营养来源,可用于提供形成虾饲料的替代品( 萨莫拉-西莱罗等人。,2018年 )。因此,我们假设FHA和HA的添加剂会增加虾的生长、存活和收获。最后,我们评估了FH和HA在虾培养水中是否具有抗菌活性,特别是来自 弧菌 细菌一直是虾养殖业的一个关键问题( 阿吉勒拉-里维拉等人。,2019 ).
材料和方法
道德宣言
该实验议定书是根据越南关于使用实验动物的立法准则(33/2005/ND-CP和第79/2015/QH13号法律)执行的。
材料
碳酸酶是从诺沃酶越南分部购买的。血清测试包是从越南科技部购买的。硫酸(H) 2 所以 4 , 99%), hydrochloric acid (HCl, 99%), sodium hydroxide (NaOH, 99%), 2,4-dinitroflourobenzene (DNFB: C 6 H 3 元素网络 2 O 4 ,99%是从西格玛-阿尔德里奇(圣.美国,密苏里州)。在这个实验中使用的其他化学品都是分析级的,并按所收到的使用。用酶水解法制备FH和HA,然后用我们以前的报告( 越南等国,2019 , 2020 )。FH和HA的属性在补充无花果中显示。S1和S2,以及 表1 .富营养素蛋白含量高(超过38%),其中许多必需氨基酸显示在 表2 其中大多数肽的兆瓦小于1,000天。其含有八个必需氨基酸和12个非必需氨基酸( 表2 )。哈纳米颗粒的平均尺寸为CA。高孔隙度和均匀性的150纳米(补充图)S2)。在HA样品中的主要元素成分,包括钙和磷,钙/磷比为1.83。这一比率与动物和人体骨骼的钙/磷比率非常接近(CA/P比率为1.67)。此外,还有许多微量元素,包括钠、镁、锌和铝。在房委会样本中,没有发现镉、汞和铅等重元素(低于检测阈值; 越南等国,2019 ),表明所生产的HA是高纯度及安全的。
Table 1. 鱼蛋白水解物和鲶鱼副产品纳米羟基磷灰石的性能
鱼类蛋白水解物 纳米羟基磷灰石
参数 满意的 参数 满意的
蛋白质(克/升) 38.74 ± 2.15 Protein (%) 元素元素
Lipid (%) 1.95 ± 0.25 Lipid (%) 元素元素
干物质(%) 40.6 ± 2.32 Moisture (%) 0.40 ± 0.04
氨基酸(毫克/克蛋白) 420.16 钙(毫克/千克) 302.903
外表 深褐色 磷(毫克/千克) 165.539
气味 天然芳香素 钾(毫克/千克) 963.73
镁(毫克/千克) 2.03
汞(克/千克) 元素元素
铅(克/千克) 元素元素
镉(克/千克) 元素元素
平均粒径(纳米) 150
是的,没有发现。
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Table 2. 鲶鱼副产品水解蛋白的氨基酸组成
氨基酸 含量(毫克/克蛋白)
精氨酸 30.24
丝氨酸 5.04
天冬星的 42.85
谷氨酸的 38.40
羟基丙氨酸 26.54
糖的 40.92
三元的 12.45
丙氨酸 39.88
氨基丁酸 2.82
普莱恩 18.83
甲硫氨酸 14.38
瓦林 12.45
苯丙氨酸 3.56
半胱氨酸/半胱氨酸 10.97
异亮氨酸 3.56
酪氨酸 36.17
亮氨酸 7.41
鸟氨酸 46.11
赖氨酸 15.57
有组织的 12.01
非必需氨基酸总量 81.39
必需氨基酸总量 338.77
氨基酸总量 420.16下载表格
实验虾
健康后幼虫 L. vannamei 是从当地一家公司获得的(越南,兴华),并转移到了下庄的孵化场。12日龄后幼虫(PL12)平均重量为0.19~0.01克,平均长度为16.85~0.34mm。在半封闭循环系统中,他们在一个孵化所中被培养了8天,每天进行20%的换水。在此期间,虾的饲料是商业饲料(沙伦博克芬德组(CP),38%的蛋白质和6.5%的脂质,详情见下文)。此外,随机选择20天后健康幼虫(PL20)进行实验。
实验设计
从鲶鱼副产品中获得的FH和HA的混合物被添加到商业饲料中(PL20-PL55的颗粒,泰国曼谷)。我们使用商业饲料作为控制处理和添加剂的FH和HA,对虾的饲料标准化。用人工饲料研究营养素、外源酶、益生菌、益生菌、植物和免疫刺激剂添加剂的影响( 查巴尼等人。,2020年 ; Encarnação, 2016 )是水产养殖研究中常用的方法。实验罐系统见补充图.S3.五种饮食( 表3 所制备的粗蛋白含量分别为38%、38.5%、40%、43%和44%,相应于在商业饲料中添加0%、1%、3%、5%和7%FH和HA混合物。商业饮食(CP,38%的蛋白质,6.5%的脂质)作为参考(控制治疗或治疗1)。实际上,它首先以60毫升/升的浓度分布到FH中。将FHH和HA的混合物注入喷雾器,摇匀后喷洒到商业虾饲料中,粗蛋白分别达到38.5%、40%、43%和44%(处理2、3、4和5); 表3)。在将这些颗粒干燥至含水量11%之后,将其送至实验罐中用于虾。
Table 3. 太平洋白虾饲料中混合速率的饮食配方( 凡纳美对虾 )
参数 治疗1(控制) Treatment 2 (1%) Treatment 3 (3%) Treatment 4 (5%) Treatment 5 (7%)
粗蛋白 38.0 38.5 40.0 43.0 44.0
粗脂 6.0 6.5 7.0 8.0 8.5
钙 1.3 1.3 1.3 1.4 1.4
磷的 1.5 1.5 1.5 1.5 1.6
赖氨酸 2.1 2.4 3.0 3.6 4.1
蛋氨酸+氰氨酸 1.1 1.6 2.5 3.5 4.3
纤维 3.0 3.0 3.1 3.1 3.1
Moisture (%) 11 ± 0.3下载表格
每一次处理都有三个复制体,其中250升玻璃纤维水箱充满海水,盐度为30~33psu,温度为29℃~30℃。养虾密度为250只虾/水箱。
虾文化管理
从汗河省下庄海滩采集海水,盐度为30-33psu。用氯化法去除海水中的生物体,包括病毒和病原体,浓度为50克/米 3 .氯化海水在去除水中的所有氯之前都被大量地曝气。随后,水在使用前,通过一个由1头猪组成的微滤管过滤。
水箱中的海水每天被抽走并以总流量5%的速度交换。在整个实验期间,虾被喂养4次/天。在最初的15天里,虾被提供了两只孵化的虾 阿特米亚 (相当于4克/米) 3 /时间),两次使用冰箱150型商用饲料(相当于2-6克/米) 3 /时间)。在20-55天的年龄里,虾的饲料是商业饲料(没有。制造商CP的1,曼谷,泰国),以及从副产品鲶鱼中添加FH和HA的混合物。
环境处理条件,包括温度、酸碱度、碱性、 2 – , NH 4 + , dissolved oxygen (DO), total bacteria (TPC), 弧菌 细菌,被监测过。养殖虾的水箱系统载于 Fig. 1 .
fas-26-6-367-g1Fig. 1. 实验罐系统。 1,水箱250升;2,供水管;3,水排放;4,主软管提供氧气;5,软软管向水箱注入氧气;6,供应水上/关闭阀;7,生物水过滤系统。下载原图
数据收集
采用温度、酸碱度、碱度、NO等物理化学参数对培养环境进行监测和控制。 2 – , NH 4 + ,真的。详细地说,每天在早上7:00-7:30和下午3:00-3:30时,用温度计和酸碱值计测量温度和酸碱值,每三天测量一次(HY98127-Hana,伍恩达奇,里,美国);碱性,亚硝酸盐。用酸性滴定法分析了碱度,并用品太酚蓝法测定了DO。血清测试试剂盒测定亚硝酸盐含量。每星期收集水样,以测定TPC及 弧菌 细菌以确保培养水不会影响虾的生长发育。用培养水稀释法测定TPC密度,并在由1.5%钠组成的营养琼脂上计数菌落形成单位(CFUS)。同样,总密度 弧菌 细菌测定方法是在TBC琼脂板上计数CFUS。具体而言,最初的水样(浓度10) 0 )在三种不同浓度下,用0.85%盐水稀释:10 –1 , 10 –2 , 10 –3.随后,从每稀释的水样本中提取的100升被分散到NAA或三氯环己烷介质中,每一浓度重复两次。样本在24℃24小时内孵化,细菌密度用以下公式计算:
细菌密度 ( 能力建设/能力建设 ) = 殖民地数量 × 冲淡 × 10.
采用目镜显微镜,随机采集20只幼虫后虾,测定其总长度。此外,还使用了精确度为0.1毫米的尺、精确度为1毫克的小型平衡尺,测量了PL-20、PL-27、PL-34、PL-41、PL-48和PL-55的长度和重量。存活率记录在第55天。
存活率 ( % ) =… 百分比 属于…的 小虾 幸存的 PL-55 实验开始时虾的数量
产量=虾的平均收获重量x收获密度.
我们用令人震惊的福尔马林来测试虾的健康状况。收集了50只虾,并将其转移到一个含有福尔马林溶液(百万分之100)的1升烧杯中,并对其存活进行了30分钟的追踪(Tcvn8398:2012)。如果生存率为100%,虾被认为质量好。
我们进一步检查了虾的质量,用扫描电子镜扫描虾壳的形态和结晶度(扫描电子镜,S-4800,日立,东京,日本)和X射线衍射仪(XRD,P分析,X'点-Pro-MPD)与铜α辐射,分别。
统计分析
通过单向差异分析和图基的多重比较对平均值进行了比较。统计上的差异在 P <0.05。所有的统计分析都是使用8.5.2版本的统计软件进行的(原件实验室,首尔,韩国)。
结果和讨论
实验系统中的环境参数
环境条件是影响白腿虾生产成功的关键因素。整体而言,实验罐内的环境条件( 表4 )在合适范围内生长及发展白脚虾( 冈萨雷斯等人2010年 ; 廖鸿渐,2011年 )。具体而言,五种处理的平均温度没有统计学差异.早上温度为29.4℃至29.7℃,下午温度为30.1℃至30.6℃( 表4 ),在27°C至31°C的最佳热范围内生长的白腿虾( 阿马亚等人。,2007年 ; 戴维斯和阿诺德,1998年 ; 伊斯帕扎-利瓦尔等人2010年 )。同样,实验罐中的PH值也略有波动。上午和下午的PH值分别在7.55-8.05和7.75-8.15之间。这些酸碱值在适合虾生长的酸碱值7.5-8.5( 马克等人。2010年 )。在所有五种处理中,DO值均在5.5毫克/升左右,高于5毫克/升,这是虾生长最大的DO基准水平( 博伊德和格罗斯,1998年 ; Chanratchakool, 2003 )。生长发育的最佳碱性 L. vannamei 从100毫克到120毫克 3 /L ( 等等。,2022年 )。根据测量结果,实验中的碱性值在103.3-105.8毫克碳酸钙之间。 3 很适合虾的生长。
Table 4. 5个饲养池的环境参数 凡纳美对虾 在实验期间
参数 FH和HA混合物的百分比(%)
治疗1(控制) Treatment 2 (1 %) Treatment 3 (3 %) Treatment 4 (5 %) Treatment 5 (7 %)
温度(℃)
我 29.50 ± 0.08 A 29.50 ± 0.07 A 29.40 ± 0.08 A 29.70 ± 0.09 A 29.60 ± 0.07 A
下午 30.10 ± 0.09 A 30.50 ± 0.08 A 30.60 ± 0.08 A 30.60 ± 0.06 A 30.50 ± 0.05 A
酸碱
我 7.55 ± 0.02 A 7.55 ± 0.03 A 7.55 ± 0.02 A 8.05 ± 0.01 b 8.00 ± 0.02 b
下午 7.75 ± 0.01 A 7.55 ± 0.02 A 7.95 ± 0.01 b 8.15 ± 0.02 b 8.05 ± 0.03 b
(毫克/升) 5.50 ± 0.25 A 5.50 ± 0.20 A 5.50 ± 0.22 A 5.50 ± 0.24 A 5.50 ± 0.22 A
碱性(毫克钙-3/升) 103.3 ± 0.85 A 105.2 ± 0.92 b 105.8 ± 1.17 b 105.5 ± 1.09 b 107.5 ± 1.22 b
硝基-N(毫克/升) 0.55 ± 0.09 A 0.42 ± 0.04 A 0.32 ± 0.06 b 0.30 ± 0.07 b 0.32 ± 0.09 b
氨氮总量(毫克/升) 0.23 ± 0.07 A 0.33 ± 0.05 A 0.27 ± 0.05 A 0.31 ± 0.04 A 0.29 ± 0.04 A
a,b 同一行中的不同字母表示统计意义( P 塔基的多重比较结果。
鱼类蛋白水解物;HA,纳米羟基磷灰石;DO,溶解氧。
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在所有的治疗中,平均值是 2 – 浓度范围在0.30-0.55毫克/升之间,在幼虫发育后的各个阶段,这一范围是相似的( 表4 )。令人惊讶的是,没有 2 – 在控制治疗中最高(0.55毫克/升)。相比之下,5%重的治疗。混合物中最低的 2 – 水平(0.30毫克/升)。尽管待遇不同 2 – 浓度, 2 – 比1毫克/升低2-3倍,适合发展白腿虾( 萨莫查等人。2004年 )。结果表明,饲养水的物理和化学条件在适当的范围内,可供其存活和生长。 L. vannamei (专业人员20-专业人员55)。结果表明,饲料中FH和HA混合物的添加对养殖虾的水质无不良影响。
细菌总数和 弧菌 细菌
细菌总数(TPC)
不同的培养时间,不同的处理方式对饲养水中总细菌密度的影响有很大的差异。八天后(PL-20),总细菌密度介于4.0~4.8×10之间。 3 科技人员/语言能力( 表5 )及无显著差异( P 在各种治疗中。15天后(PL-27),对照组(处理1)的总细菌密度约高出2倍( P 与其他四种治疗方法相比。TPC在第4和第5处理中最低,且显著低( P 与处理2和处理3相比。在22天后的5次治疗中观察到类似的TPC模式(PL-34)。这些结果并不奇怪,因为蛋白质水解物被认为能抑制微生物活动( 康等人。,2019 )。我们先前的研究表明,从鲶鱼副产品中获得的FH具有自由基清除活性( 哈桑等人。,2019 )。当FH浓度足够高时(处理4和5),自由基清除活性最大,从而降低培养环境中的细菌密度( 越南等国,2019 )。在27天和36天后(PL-41和PL-48),所有五种治疗中的TPC大幅增加到20×10 3 – 44 × 10 3 在实验开始时的治疗中,CFU/ML大约比最初的TPC高出五至十倍,但控制和其他治疗之间的TPC差异不那么明显,但第4和第5治疗也显示出较低的TPC。这可能表明某些细菌对FH存在的适应性,这需要进一步的研究。但是,实验结束时TPC大大减少,在8~9.50×10之间 3 不明原因。在整个培养过程中,细菌总密度远低于10。 7 浓度最低,对虾的生长发育有负面影响( Anderson, 1993 ).
Table 5. 培养水中细菌总密度(单位:10) 3 能力建设/能力建设)
阶段 总细菌密度(10) 3 能力建设/能力建设)
治疗1(控制) Treatment 2 (1 %) Treatment 3 (3 %) Treatment 4 (5 %) Treatment 5 (7 %)
PL-20 4.80 ± 0.34 A 4.50 ± 0.23 A 4.30 ± 0.31 A 4.00 ± 0.28 A 4.00 ± 0.27 A
PL-27 12.90 ± 1.54 A 7.60 ± 0.74 b 7.20 ± 0.87 b 6.40 ± 0.63 C 6.60 ± 0.88 C
PL-34 14.40 ± 1.81 A 9.60 ± 1.31 b 8.50 ± 1.11 b 7.60 ± 1.08 C 7.80 ± 1.12 C
PL-41 25.50 ± 2.43 A 23.70 ± 2.28 b 21.40 ± 2.03 C 20.70 ± 2.32 C 20.50 ± 2.38 C
PL-48 42.00 ± 3.95 A 43.80 ± 3.34 A 42.30 ± 3.55 A 41.10 ± 3.26 b 41.30 ± 2.98 b
PL-55 9.50 ± 0.94 A 8.90 ± 0.79 b 8.30 ± 0.86 b 8.00 ± 0.93 b 8.10 ± 0.98 b
公元前 同一行中的不同字母表示统计意义( P 塔基的多重比较结果。
后幼虫。
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弧菌总数
与TPCS相似,第1和第2处理方法的含量最高 弧菌 density, 0.14 × 10 3 在储存了8天后,CFU/ML有很大的不同(P-20)。 P < 0.05) compared to Treatments 3, 4, 5 ( 表6 )。在15天的库存(PL-27)之后,也观察到类似的模式,其中 弧菌 细菌为0.58x10 3 治疗中的CFU/ML有显著差异( P 与其他治疗方法相比。第36天(PL-48),总密度 弧菌 5种治疗中的细菌在2.57~3.81x10中大幅增加 3 在培养环境中,CU/ML占细菌总数的6.3%-9.1%。这一结果与TPC的模式相似。PL-55的结果表明,治疗4和5的含量最低。 弧菌 density, 0.09 × 10 3 CFU/ML,有显著差异( P 0.05)与处理1和2相比( 表6 )。这也是由于自由基清除自由基的活动,如上文所述。另外, 弧菌 细菌低于6.5×10 3 CU/ML,比总数高54-72倍 弧菌 我们在实验中发现的细菌,不会影响养虾的健康( 李&陈,2008年 ).
Table 6. 总计 弧菌 培养水中的细菌(单位:10) 3 能力建设/能力建设)
阶段 总细菌密度为5(10) 3 能力建设/能力建设)
治疗1(控制) Treatment 2 (1 %) Treatment 3 (3 %) Treatment 4 (5 %) Treatment 5 (7 %)
PL-20 0.14 ± 0.04 A 0.12 ± 0.04 A 0.08 ± 0.01 b 0.06 ± 0.01 b 0.06 ± 0.01 b
PL-27 0.58 ± 0.06 A 0.46 ± 0.05 b 0.35 ± 0.04 C 0.33 ± 0.03 C 0.32 ± 0.03 C
PL-34 0.72 ± 0.08 A 0.57 ± 0.06 b 0.43 ± 0.06 C 0.39 ± 0.05 C 0.39 ± 0.05 C
PL-41 2.74 ± 0.28 A 2.17 ± 0.19 b 1.86 ± 0.15 C 1.62 ± 0.15 C 1.76 ± 0.21 C
PL-48 3.81 ± 0.42 b 2.83 ± 0.31 b 2.78 ± 0.29 b 2.57 ± 0.31 b 2.64 ± 0.19 b
PL-55 0.12 ± 0.02 A 0.12 ± 0.03 A 0.10 ± 0.01 b 0.09 ± 0.01 b 0.09 ± 0.01 b
公元前 同一行中的不同字母表示统计意义( P 塔基的多重比较结果。
后幼虫。
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幼虫后虾的生长
幼虫后虾的重量
虾(PL12-PL27)的重量无显著差异,在头两周的培养中加入FH和HA混合物,没有显示在五个处理中( P 在五个实验治疗中,平均每周体重增加。详细而言,虾的重量每星期增加0.24克至0.44克。在后期阶段(PL41-PL55),每周的体重增加高于PL12-P27( Fig. 2 )。每周平均体重增加幅度分别为0.82克和1.20克/周,这与以往研究的结果一致( 阿马亚等人。,2007年 ; 阿拉内达等人。2008年 ; 德迪奥斯,2001年 ; 马克等人。2010年 )。重要的是,在处理4(添加5%的FH和HA混合物或总共43%的粗蛋白含量)中,每周平均体重增加的最高值高于处理1、2、3和5( Fig. 2 和 表7 , P 0.05)。在实验结束时,FH和HA对虾生长的积极影响一般更明显。一般来说,蛋白水解物含有短链和低分子量的蛋白质,促进营养素的吸收( 侯等人。,2017年 )。实际上,先前的一项研究表明 L. 凡纳米具有较高的必需氨基酸表观消化系数(AAS)和禽类副产品蛋白水解物的能量,促进虾的生长( 苏亚雷斯等人。,2020年 ). L. 凡纳美鱼可能有类似的AAS和能量从蛋白水解的鲶鱼副产品。蛋白水解物中AAS的ADC含量越高,可能是提高人体体重的重要因素。 L. 在我们的研究中。, 苏亚雷斯等人。,2020年 )。另外,建议测试添加FH和HA是否也可以平衡饮食中的AAS,这也可能是加速人体生长速度的另一种机制。 L. 凡纳梅伊( 金等人。,2019)。有趣的是,在饲料中加入5%以上的混合物,并没有进一步增加每周的体重增加,这意味着最大的蛋白质需求量可以满足约43%的粗蛋白含量。
fas-26-6-367-g2Fig. 2. 体重(克) 凡纳美对虾 鱼粉中不同水平的鱼蛋白水杨酸盐和纳米羟基磷灰石补充物。 后幼虫。下载原图
Table 7. 最终重量,长度,生长,存活率,虾产量55天以上的五种处理
治疗 最后长度(毫米) 最后重量(g) 增长(克/周) Survival (%) 产量(千克/米 2 )
1 97.28 ± 0.89 A 4.15 ± 0.18 A 0.77 ± 0.02 A 98.30 ± 0.96 A 2.45 ± 0.06 A
2 98.30 ± 0.86 A 4.32 ± 0.15 A 0.81 ± 0.01 A 98.40 ± 0.79 A 2.70 ± 0.11 A
3 98.22 ± 0.88 A 4.72 ± 0.15 b 0.87 ± 0.02 A 97.50 ± 0.60 A 2.95 ± 0.10 A
4 104.65 ± 0.65 b 5.07 ± 0.19 公元前 0.96 ± 0.03 b 97.30 ± 0.72 A 3.55 ± 0.08 b
5 102.18 ± 0.68 C 4.96 ± 0.21 C 0.93 ± 0.04 b 96.50 ± 0.96 A 3.50 ± 0.08 b
公元前 同一栏中的不同字母表示统计意义( P 塔基的多重比较结果。
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幼虫后虾的长度
所有处理方法中虾的总长度无显著差异( P > 0.05; Fig. 3 以及补充图。(3)在两周的文化之后(P12-P27)。从16.85毫米到55.10毫米不等。长度的增加与虾重生长率的变化规律一致(见 Fig. 2 )。在这些阶段,虾的生长长度在五种处理中相对均匀。这些结果与以往有关虾长的研究结果一致( 阿丽亚迪等人,2019 ; 怀班等人。1995年 )。在后一阶段(PL34),总长度增加得更快,但在五种处理方法( P > 0.05; Fig. 4 )。治疗1、2、3、4和5的总长度分别为69.20、69.90、救75、71.65和70.65毫米。但是,P41-PL55虾的长度增长率在处理4和处理5比其他处理快得多。结果是大大高于( P处理4和5的虾比处理1、2、3的虾生长率高。处理1、2、3、4和5的虾的长度分别为79.75、80.25、80.95、82.80毫米和97.50毫米,以及97.28、98.30、98.22、104.65和102.18毫米。处理4的虾长的最高生长率与每周虾重的差异一致,可能是类似机制的解释。
fas-26-6-367-g3Fig. 3. 身体长度(毫米) 凡纳美对虾 鱼粉中不同水平的鱼蛋白水杨酸盐和纳米羟基磷灰石补充物。 后幼虫。下载原图
fas-26-6-367-g4Fig. 4. Shrimp photos. (a) PL20, (b) PL27, (c) PL34, (d) PL41, (e) PL55. 后幼虫。下载原图
PL-55的存活率和产量
在PL55治疗中,治疗1(98.4%)和治疗2(98.6%)的存活率最高,治疗3和4(97.9%)的存活率略低。治疗5的最低发病率为96.9%。然而,所有五种治疗的存活率并无显著差异( P 0.05)。所有五种疗法的存活率详情见 表7 以及补充图。S4.这种存活率与34~35天龄虾的存活率(~98.1%)相当,其饲养密度为1.760虾/米。 3 ( 萨莫查等人。2004年 )和虾的储存密度为37.5虾/米。 3 ( 阿马亚等人。,2007年 )。这一结果可以用密度对存活率的影响来解释,因为在我们的研究中,虾的养殖密度比以前的饲养密度低( 阿马亚等人。,2007年 )。实际上,以前的研究表明 L. vannamei 与生存密切相关( 阿佩尔鲍姆等人。,2002年)。此外,主要离子浓度较低,如钾,可能会影响其存活率,而我们的研究并没有这样做。
反应4(3.52千克/米)时,PL55的收率最高。 2 )及最低浓度1(2.45千克/米) 2 )。不过,治疗4有很大不同( P 与治疗1,2,3相比,但无差异( P 比较治疗5。虾的存活率和产量结果表明,饲料中来自鲶鱼副产品的FH和HA混合物的补充可以提高虾的产量。 L. vannamei与非附加治疗相比。饲料中FH和HA的混合物适合虾的生长.此外,补充剂不影响培养环境,导致产量高于非添加处理。
虾的品质检查
检查PS-55收获后虾和虾壳的质量对于虾的分类、评价和选择首选的容器和运输方法而不降低虾的质量至关重要。在福尔马林溶液中,pl-55被震惊30分钟,结果是100%的活虾。这表明虾有良好的健康和质量。
在经过或不经过任何补充处理后,虾壳的不同形态和表面结构证实了补充物的影响。 Fig. 5 展示虾壳的扫描电镜图像,这些虾壳是从没有补充处理(处理1)和补充处理(处理4)的虾中剥离出来的。在不同的放大下,两个贝壳样品的表面形态由非晶态聚合物(甲壳素和蛋白质)层和矿物颗粒组成。然而,在从第4号处理中提取的样本中观察到更多的微粒( Fig. 5c 和 5d)。这种现象可以归因于HA纳米颗粒,它可以作为钙的来源来形成虾壳中的矿物。在x射线衍射测量中也观察到这种不同的结构。
fas-26-6-367-g5Fig. 5. 从(a,b)处理1和(c,d)处理4获得的虾壳P55的不同放大度扫描电子镜图像。 后幼虫。下载原图
从处理1和处理4获得的虾壳的XRD模式在 Fig. 6 .由于虾壳中甲壳素的结晶度,这两个样品都显示出在220度的显著峰值。此外,由于大量的碳酸钙,在大约30度左右有一个特定的峰值(处理4) 3 在虾壳里( 萨赫比等人。,2007年 )。此结果与扫描电镜结果一致.
fas-26-6-367-g6Fig. 6. 从(a)处理1和(b)处理4获得的虾壳的X射线衍射仪图案。下载原图
结论
从鲶鱼副产品中获得的FH和HA的混合物适合于在虾幼虫后添加饲料。 (L. vannamei). 该补充物促进了虾的快速生长,并没有对虾培养的环境条件产生不利影响。经过35天的培养 L. vannamei 虾的平均体重和长度为每周0.97G和7.37毫米(处理4),高于对照处理(处理1)。 弧菌 培养水的密度处于受控水平。