介绍
观赏鱼表现出各种吸引人的特征，例如体色、体型和水族箱的适宜性（Khomdram，2018）。全球范围内交易的各种观赏鱼约有 5,000-6,500 种淡水物种和 1,600 种海洋物种（Moorhead & Zeng, 2010）。根据 Moorhead & Zeng (2010) 的数据，观赏渔业产业已达到 150 亿美元 (USD)。

全球对观赏鱼的需求不断增长，价格不断上涨，但由于压力不断加大，可持续的保护和养殖努力却没有随之而来（Nunez 等人，2019），特别是由于过度捕捞和环境退化，野生捕获的鱼类（Lotze 等人） al., 2006），或气候变化（Beaugrand & Kirby, 2018）。在上述问题中，淡水生态系统面临的问题比海水生态系统更为严重（IPBES，2019）。然而，与海水生态系统相比，保护工作的范围相对较小（Strayer & Dudgeon，2010）。

西里伯斯彩虹鱼（Marosantherina ladigesi）是印度尼西亚观赏鱼的一种，自 1976 年起开始出口。主要进口国之一是德国（Hadiaty，2007 年）。彩虹鱼的出口完全依赖于野生捕捞，虽然这些鱼可能在不久前在河流中大量发现，但无限制的捕捞甚至会涉及毒害（Hadiaty，2007）以及由于周围的定居点和农业活动而导致的水生环境的变化。河流（Gebrekiros，2016）使鱼类变得越来越难以找到，并表明它们几乎已经消失。

对西里伯斯彩虹的研究是有限的，特别是在其栽培方面。目前还没有针对驯化阶段饲料使用的具体研究报告；因此，本研究以彩虹鱼养殖为重点，采用自然界鱼类的食性，尝试几种饲料。根据Bilio (2007) 的说法，在水产养殖活动有限的情况下，进食习惯是重要的信息。每种鱼类的摄食习性各不相同，但含有鱼粉和活食的饲料通常更容易被家养鱼类接受（Li et al., 2019））。另一方面，类型、营养的差异和许多其他差异将影响饲料利用率并最终影响鱼类生长（Hien et al., 2016）。饲料必须数量充足、易于食用和有效消化，并且含有支持鱼类生长和健康的营养物质。因此，重要的是逐步引入新型饲料，让鱼类在饲养期间适应饲料类型，这些饲料应该是廉价的、容易获得的和可持续的（Dietrich et al., 2021））。然而，在西里伯斯彩虹中，没有关于驯化阶段合适食物的信息，这就是为什么对四种不同特性的饲料进行了研究的原因；活 Tubifex sp、干Tubifex sp、人造碎粒和天然饲料螺旋藻。这四种实验饲料的营养成分几乎相同，特别是蛋白质，但具有不同的物理和生物特性

该试点研究的主要目的是调查几种最佳饲料在提高绝对生长率（AGR）、特定生长率（SGR）、成活率（SR）、饲料转化率（FCR）和饲料效率方面的潜力。 (FE)、西里伯斯彩虹的血液学、免疫和病原体抵抗力。

材料和方法
实验鱼的准备及饲养条件
实验动物是从印度尼西亚南苏拉威西岛班蒂穆隆河获得的雄性西里伯斯彩虹。将鱼在实验室饲养 14 天，以适应研究条件、选择尺寸并确定鱼的健康状况。适应环境对于改变野生鱼类的排尿习惯也是必要的。将平均体重为1.32±0.21 g/条、标准长度为4.0±0.55 mm的雄性鱼360条随机放入12个容积为54升的水族箱中（30条鱼/水族箱）。在饲料处理过程中，水质参数保持在与野外相同的范围内：水温27°C–29°C，溶解氧 6.0–6.4 ppm，pH 7.0–7.3，碱度 115–141 ppm，硬度 109–125 ppm。除了随时进行虹吸以去除积累的残留饲料或鱼粪便外，每天换水20%。

实验饮食的制备
测试的四种饲料包括活的Tubifex sp 蠕虫、干Tubifex sp 蠕虫、钝顶链霉菌粉和人工碎屑饲料。活的 Tubifex sp 蠕虫是在水产养殖者周围提供的最佳培养条件下制备的，而S.platensis、干Tubifex 蠕虫是在水产养殖者周围提供的最佳培养条件下制备的sp和碎饲料是商业产品。将每种测试饲料随机投放到装满鱼的水族箱中，重复三次，每天两次将鱼人工喂饱，持续六周。试验饲料的营养成分如表1所示 。

学习规划
本研究中使用的设计是完全随机的设计，有四种类型的饲料处理，包括活的Tubifex sp 蠕虫、干燥的 Tubifex sp 蠕虫、钝顶链球菌粗粉和人工碎粒，每种一式三份。

饮食和鱼类的分析程序
研究参数包括AGR、SGR、SR、FCR、FE、白细胞总数、吞噬活性、血细胞比容（Ht）、血红蛋白、红细胞总数、肠道和肝脏组织学以及鱼类免疫系统测定。在研究开始和结束时通过称重 15 条鱼/水族箱的重量来观察生长性能。鱼的 AGR、SR 和 FE 是根据Busti 等人计算的。（2020）和Farhad 等人。（2023）。通过在研究结束时（第 42 天）每个研究单位随机收获 3 条鱼并使用 MS-222（Sigma-Aldrich，圣路易斯，密苏里州，美国）以 50 毫克的剂量麻醉它们来观察鱼类血液学。 /L（普里博斯基和维利塞克，2018）。血液学参数总白细胞、总红细胞和分类白细胞根据Blaxhall & Daisley (1973)进行，而吞噬活性根据Anderson & Siwicki (1993)进行，Ht根据Alexpandi等人进行。（2020）。

为了观察鱼肠的发育和鱼肝脏中能量储备的储存，在研究结束时，对每种饲料处理中的三条鱼进行了组织学制备。为了进行组织学准备，用 MS 222 (50.0 mg/L) 麻醉鱼，然后通过腹腔仔细解剖鱼。取出鱼肝和肠并固定在 10% 甲醛中（Ogueji 等人，2020）并使用组织学方法进行处理。将包埋在石蜡中的组织切成5μm厚的切片并用苏木精和伊红染色。使用光学显微镜观察载玻片，观察用几种类型的饲料处理后肠道和肝脏组织的变化。描述性观察肠和肝组织学结果。鱼的肠道组织学根据鱼肠绒毛的生长、杯状细胞和固有层的存在以及肝脏组织学根据含有糖原作为能量储备的子宫细胞的粘着性差异进行描述和评分。

挑战测试
研究结束时进行了挑战测试，将鱼在 5 升容器中饲养 7 天，每次重复。通过将嗜水气单胞菌以10 7 CFU/mL的密度散布 到含有2升充气水的容器中来完成感染。待细菌均质后，将五条鱼放入容器中。24小时后，将鱼转移至5升水容器中并饲养7天。每天观察累积SR，直到攻击后测试第7天。

数据分析
使用 SPSS 版本 22（IBM，Armonk，NY，USA）对 AGR、SGR、SR、FCR、FE、血液学和 SR 攻击后测试的数据进行统计分析，并使用单向方差分析测试，然后使用 Tukey 多重分析范围测试以确定治疗效果。对鱼肠和肝脏的组织学进行了描述性分析。

结果
存活率
研究期间西里伯斯彩虹鱼的存活率（表2）为64.45%~83.33%。受试鱼的存活率最高的是鱼饲活的Tubifex，其次是鱼饲人工饲料、钝顶链霉菌粉，干Tubifex最低。总的来说，这表明试验饲料可以被鱼利用。这与彩虹鱼的杂食性饮食习惯密切相关。

鱼类生长
通过 AGR 和 SGR 测量的鱼类生长情况（表 2）显示研究期间鱼类生长有所增加。不同饲料对鱼的生长有显着影响（p <0.05）。Tukey 的后续测试表明，鱼饲喂活Tubifex sp 蠕虫的 AGR、SGR 和最终鱼重最高，然后是人工饲料处理、钝顶链霉菌粉，最后是干Tubifex sp 蠕虫（p < 0.05）。

饲料转化率（FCR）和饲料效率（FE）
表 2列出了四种饲料处理中彩虹鱼的 FCR 和 FE 。对四种不同类型饲料的测试表明，对 FCR 和 FE 都有显着影响 ( p < 0.05)。在测试的饲料类型中，与其他处理的鱼相比，使用活Tubifex sp 的彩虹鱼的 FCR 最低，而在干Tubifex sp 饲料中观察到最高的 FCR。同样，用活Tubifex处理的鱼的 FEsp 饲料比其他处理更有效，并且干 Tubifex 饲料的 FE 最低 ( p < 0.05)。

鱼类血液学
本研究中试验鱼的血液学均表现出四种饲料处理的效果（p <0.05；表3）。四种不同的饲料在鱼类血液学方面表现出不同的增加，但与干燥的Tubifex sp 和 S.platensis饲料相比，活的Tubifex sp 饲料的所有血液学参数的血液学增加最高且最显着。

鱼肝脏的组织学在细胞凝聚力、糖原含量（能量储备）和脂肪含量方面也表现出差异。活鱼喂养的Tubifex sp的肝脏比其他3种处理的肝脏要好（图2）。

挑战测试
使用不同类型的饲料饲养六周后，进行了挑战测试以确定鱼对气单胞菌的抵抗力。攻击后测试直至攻击后测试第7天的SR积累见图3。攻击测试后第3天，鱼的SR开始下降，用干Tubifex sp、S.platensis、和碎颗粒测试饲料。在攻击测试后第 4 至 7 天，所有处理中鱼死亡率较高后，SR 积累量均较低。对攻击后第 7 天的鱼的 SR 进行统计分析，结果显示，根据测试饲料的类型，鱼对感染的抵抗力有所不同 ( p < 0.05)。Tukey 的后续测试表明，鱼饲的活Tubifex sp 的抗病能力最高（p < 0.05），而鱼饲的干Tubifex sp 和S.platensis的抗病能力最低。

讨论
已经进行了使用不同类型的饲料来维持西里伯斯彩虹的研究。这项研究表明，西里伯斯彩虹鱼可以利用所有类型的测试饲料，尽管根据统计测试，活Tubifex sp 优于其他类型的测试饲料 ( p < 0.05)。与颗粒饲料、钝顶链球菌和干Tubifex sp 相比，饲喂活Tubifex sp 蠕虫的鱼表现出更好的 AGR、SGR、SR、FE、血液学、免疫力和更低的 FCR （表 2 和 3）。这些结果与在孔雀鱼中使用Tubifex sp 蠕虫一致（网纹Poecilia；Perera & Bhujel, 2022 ) 和小丑泥鳅鱼Cromobotia macracantus ( Putra 等人, 2019 )，展示了最佳的生长和 SR。对几种类型的羌翅虫 chitala种子饲料进行 60 天的类似研究表明， Tubifex sp 可以增加生长和消化酶活性，并提高 SR（Sontakke 等人，2019）。同样，使用Tubifex sp 蠕虫饲料八周（Arslan 等，2009）导致南美鲶鱼幼鱼 surubim（ Pseudoplatystoma fasciatum ）的活体饲料、商品饲料和配合饲料中的增长率最高。使用Tubifex sp 蠕虫也增加了 SGR，并在饲养 28 天后导致Chitala chitala的 SR 最高（ Sarkar 等，2006）。

本研究中的血液学观察显示白细胞总数、吞噬活性、红细胞总数、Ht和血红蛋白的结果处于最佳范围内（表3）；这些都对鱼类的免疫力和营养代谢发挥着重要作用。血液学参数是评估鱼饲料质量和鱼类健康状况的重要决定因素（Tabassum 等，2021）。这项研究也类似于关于鳜鱼（Siniperca sp）驯化的一项研究，鳜鱼通过影响食欲调节、消化酶活性和免疫反应来影响生长性能（Li et al., 2023））、肠道微生物群和代谢分析（Li et al., 2023）。

虽然用 Tubifex 喂养的鱼比其他处理的鱼具有更高的血液学特征，但总的来说，所有处理中的鱼都表现出最佳的血液学特征。这表明研究期间接受饲料处理的鱼的生理状况是正常的。血液学参数；白细胞总数和吞噬活性在鱼类免疫中发挥作用。血红蛋白在新陈代谢中发挥作用，红细胞 (RBC) 在向组织输送氧气方面发挥作用，Ht 决定红细胞的体积 ( Taherpour et al., 2023 )。

本研究中的高血液学参数，尤其是鱼饲 Tubifex sp，与Abarike 等人的研究一致。（2022）他在罗非鱼中使用了几种天然成分。总白细胞和吞噬细胞活性在鱼类的非特异性免疫反应中直接发挥重要作用（Abarike等，2022；Chen等，2021）。本研究还表明，使用活的 Tubifex sp提高了西里伯斯彩虹对病原性疾病的抵抗力，尤其是嗜水气单胞菌攻击后的试验（图3））。鱼饲养后进行的攻击测试表明，直到第 7 天，与其他处理相比，Tubifex sp 喂养的鱼对嗜水放线菌感染 的抵抗力最高。用Tubifex sp处理的鱼的高抵抗力与 鱼的高血液学，即白细胞总数和吞噬活性（Kim 等，2021a，2021b；表 3）以及肠道中的许多单核免疫细胞和杯状细胞一致。 （表4）在增强免疫反应方面发挥作用。对于以鱼喂养的钝顶链球菌和干燥的Tubifex sp尤其如此，它们肠道内的贪食性、总白细胞、单核免疫细胞和杯状细胞的活性较低，使它们更容易受到病原菌的攻击。

虽然所测试的四种饲料的营养成分相对相同，但鱼类的AGR、SGR、SR、FCR、FE、免疫力、血液学和抗病能力存在差异。与其他饲料相比， Tubifex sp的一些优点 包括Tubifex sp 饲料的大小非常适合鱼嘴的大小，并且活的Tubifex sp 会漂浮在水中并会被鱼追逐（Busti 等人，2017）。 ，2020）。塔比菲克斯sp蠕虫也没有骨骼，因此很容易被鱼消化。此外，活的 Tubifex sp 蠕虫的气味和颜色会刺激鱼吃它们（Budiardi 等，2005）。Tubifex sp的营养成分富含n-3（C18：3n-3和C20：5n-3）、n-6脂肪酸（C18：2n-6和C20：4n-6）。Tubifex sp 蠕虫含有十种必需氨基酸；精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、缬氨酸和色氨酸。

鱼消化饲料的能力取决于饲料的物理和化学特性、饲料的类型、饲料的营养成分、鱼的大小和年龄、消化酶的类型、投喂频率、水温和化学性质（Jannathulla 等人，2019）。此外，活的Tubifex sp蠕虫对彩虹鱼来说更适口( Jannathulla et al., 2019 ; Yadav et al., 2020 )，直接影响鱼类的生长( Jingting et al., 2020 )。实时供稿，例如Tubifexsp含有鱼类所需的所有营养物质，如必需的蛋白质、脂质、碳水化合物、维生素、矿物质、氨基酸和脂肪酸（New，1999），因此所使用的饲料类型将对饲料消耗和生长发挥重要作用，以及它对鱼类繁殖的影响。使用活 Tubifex sp 饲料的几项研究表明，鱼类生长性能有所提高，包括观赏鱼C. chitala（Sarkar 等人，2006 年）、Betta splendens（Mandal 等人，2010 年）和孔雀鱼（Busti 等人，2010 年）。 , 2020）。这项研究还表明，使用活的 Tubifex sp可以提高西里伯斯彩虹对病原性疾病的抵抗力，特别是嗜水气单胞菌。

与用活的Tubifex sp喂养的鱼相比，用干燥的Tubifex sp、S.platensis和人工饲料喂养的鱼在所有测试参数中都表现出较低的性能。从物理上来说，螺旋藻粉的尺寸非常小，因此有很大比例不被鱼吃掉。同样，人工饲料也会被破坏，因此两种饲料都容易扩散，最终不会被鱼吃掉，甚至会对维持水体造成损害。虽然与活Tubifex相比，干Tubifex sp 测试饲料的适口性较低sp。试验饲料的物理和生物学缺陷导致饲料消耗量低。对于用活 Tubifex sp. 喂养的鱼来说，情况有所不同。虽然本研究中应用碎饲料配方对生长性能、免疫力和抵抗力的改善效果不及活Tubifex sp，但优于其他试验饲料，因此应用碎饲料可以替代活Tubifex sp。根据曼达尔等人的说法。(2010) , Tubifex等活食的缺点sp 并非随时可用，这使得它不切实际，并且可能含有可传播给食用它的鱼的疾病。

此外，用干Tubifex sp、S.platensis和碎饲料喂养的鱼的生长性能较低是由于碳水化合物含量高。根据拉赫曼等人的说法。(2023)，含有高碳水化合物和纤维的饲料会干扰酶接触其底物或直接与酶相互作用，从而减缓消化过程，从而损害饲料成分的消化率。关于饲料成分的营养物质消化率的信息对于提高鱼类日粮的准确性以及配制具有成本效益的饲料是必不可少的。

喂食活血虫的鱼的肠道组织学（图 1 ）显示出更致密、发育良好的肠绒毛，使它们能够机械分解饲料。这些肠绒毛的发育表明了饲养过程中测试的饲料质量（Goda 等，2020）。绒毛细胞的发育与人工饲料中的小肠绒毛几乎相同。

肠绒毛增加吸收表面积，而肠上皮细胞是吸收细胞，作为绒毛上皮的主要结构成分，调节水生动物营养分子的通过( Tabassum et al., 2021 )。杯状细胞是一种肠上皮细胞，可分泌粘蛋白、肠三叶因子和覆盖肠道表面的抵抗素样分子（Chen et al., 2021）。在某些条件下，粘液分泌会增加，包括与免疫反应相关的粘液分泌，这将在保护鱼类免受疾病方面发挥作用（Tabassum et al., 2021）。因此，鱼肠道的组织学分析对于评估饲料测试期间鱼组织水平的变化非常重要（Yadav et al., 2020）。

肝脏的组织学（图2）显示出粘聚性方面的差异，其中以鱼喂养的活 Tubifex sp的肝脏具有致密且紧凑的肝脏结构。还可以看出，以红色为主的颜色表示糖原的量，这表明能量储备较高，脂肪含量较低；另一方面，在治疗干Tubifex sp蠕虫时，肝脏以脂肪为主，糖原含量低。这支持了之前的说法，即活的Tubifex sp 饲料具有更好的消化率。

肝脏中脂肪的积累是幼虫生长和某种饲料的肝脏代谢性能的最决定性参数。具有丰富肝细胞糖原、血窦和中央静脉的正常肝脏表明该饮食不会引起胃部不适。相反会导致鱼的饲料吸收和消化不良。然而，任何鱼都没有出现肝损伤的迹象，这表明所测试的饲料作为鱼的能量来源具有积极的作用（Chen et al., 2021）。

结论
饲养测试表明，与饲喂碎粒、钝顶螺旋藻粉和干 Tubifex sp 的鱼相比，饲喂活 Tubifex sp 的西里伯斯彩虹鱼 具有更高的存活率、生长和 FE、更好的血液学和抗病性以及更低的 FCR 。